Определение шести классов психоактивных веществ в различных объектах методом иммунохроматографии Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»
ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ / НАРКОТИЧЕСКИЕ ВЕЩЕСТВА / ПСИХОАКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА / МОЧА / ПОТОЖИРОВЫЕ ВЫДЕЛЕНИЯ / ВОЛОСЫ / СМЫВЫ С ПОВЕРХНОСТЕЙ / ЧАСТИ РАСТЕНИЙ / IMMUNE CHROMATOGRAPHIC ANALYSIS / DRUG SUBSTANCES / PSYCHOACTIVE SUBSTANCES / URINE / SWEAT FATTY DISCHARGES / HAIR / SURFACE LAVAGES / PARTS OF PLANTS
Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Морозова Виталия Сергеевна, Другова Е. Д., Мягкова М. А.
Разработаны иммунохроматографические тест-системы для определения психоактивных веществ (ПАВ) шести классов: опиаты, амфетамины, каннабиноиды, экстази, бензодиазепины, метадон. Впервые созданы простые методики пробоподготовки для быстрого выявления указанных веществ в биологических и небиологических объектах: потожировых выделениях, волосах , моче , смывах с поверхностей , частях растений , неизвестных субстанциях. Представленные методы пробоподготовки и анализа не требуют специального оборудования и реагентов и могут быть использованы в «полевых» или домашних условиях неспециалистами для предварительного скрининга ПАВ.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Морозова Виталия Сергеевна, Другова Е. Д., Мягкова М. А.
Результаты исследований по выявлению лиц на факт употребления наркотических и токсических веществ
Иммунные методы анализа в практике судебно-химического отдела ГБУЗ МО «Бюро СМЭ»: 14 летний опыт применения, и есть ли у них будущее в рутинном анализе?
Юридические аспекты при проведении судебно-медицинской экспертизы на наличие наркотических веществ в организме человека
Исследование ложноположительных результатов иммунохроматографических экспресс-тестов
Употребление психоактивных веществ студентами вуза по результатам скрининг-экспресс-теста
i Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
The identification of six classes of psychoactive substances in various objects using technique of immune chromatography
The immune chromatographic test-systems were developed to detect psychoactive substances ofsix classes: opiates, amphetamines, cannabinoids, ecstasy, benzodiazepines, methadone. for the first time the simple techniques of preparation of samples were developed to fast detect the mentioned substances in such biological and non-biological objects as sweat fatty discharges , hair , urine , surface lavages , parts of plants, unknown substances. The presented techniques of preparation and analysis of samples require no special equipment and reagents. They can be applied in the «field» or domestic conditions by laymen for preliminary screening of psychoactive substances .
Текст научной работы на тему «Определение шести классов психоактивных веществ в различных объектах методом иммунохроматографии»
© коллектив авторов, 2015 УДК 615.214.31.074:543.544].078.33
Морозова в.С., Другова Е.Д., Мягкова М.А.
определение шести классов психоактивных веществ в различных
объектах методом иммунохроматографии
Институт физиологически активных веществ РАН, г. Черноголовка Московской обл.
Разработаны иммунохроматографические тест-системы для определения психоактивных веществ (ПАВ) шести классов: опиаты, амфетамины, каннабиноиды, экстази, бензодиазепины, метадон. Впервые созданы простые методики пробоподготовки для быстрого выявления указанных веществ в биологических и небиологических объектах: потожи-ровых выделениях, волосах, моче, смывах с поверхностей, частях растений, неизвестных субстанциях. Представленные методы пробоподготовки и анализа не требуют специального оборудования и реагентов и могут быть использованы в «полевых» или домашних условиях неспециалистами для предварительного скрининга ПАВ.
К л ю ч е в ы е с л о в а: иммунохроматографический анализ; наркотические вещества; психоактивные вещества; моча; потожировые выделения; волосы; смывы с поверхностей; части растений.
Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(5): 27-31. Morozova VS., DrugovaE.D., MiagkovaM.A.
THE IDENTIFICATION OF SIX CLASSES OF PSYCHOACTIVE SUBSTANCES IN VARIOUS OBJECTS USING TECHNIQUE OF IMMUNE CHROMATOGRAPHY
The institute of physiologically active substances of the Russian academy of sciences, Chernogolovka, Russia
The immune chromatographic test-systems were developed to detect psychoactive substances ofsix classes: opiates, amphetamines, cannabinoids, ecstasy, benzodiazepines, methadone. for the first time the simple techniques of preparation of samples were developed to fast detect the mentioned substances in such biological and non-biological objects as sweat fatty discharges, hair, urine, surface lavages, parts of plants, unknown substances. The presented techniques of preparation and analysis of samples require no special equipment and reagents. They can be applied in the «field» or domestic conditions by laymen for preliminary screening of psychoactive substances.
Keywords: immune chromatographic analysis; drug substances; psychoactive substances; urine; sweat fatty discharges; hair; surface lavages; parts of plants
Citation: Klinicheskaia Laboratornaia diagnostika. 2015; 60(5): 27-31.
Наиболее удобным и недорогим скрининговым методом определения наркотических веществ является иммунохроматографический анализ (ИХА). Он прост в использовании и может применяться в «полевых» условиях без оборудования. Метод получил широкое распространение в различных областях: клинической диагностике, самодиагностике, экологическом мониторинге, сельском хозяйстве и др. [11].
Эффективное выявление потребителей наркотиков проводят путем скрининга наркотических веществ в объектах разных видов: биологических и небиологических. Для установления факта приема психоактивных веществ (ПАВ) конкретным человеком и диагностики наркозависимости определяют ПАВ и их метаболиты в моче [2, 3, 9, 14], слюне [2, 4, 5], крови, волосах [2, 13], смывах с кожи (потожировые выделения), экстрактах тканей. В работе подразделений полиции, связанных с борьбой по распространению наркотиков, часто возникает необходимость определения наркотических веществ в неизвестных субстанциях, подозрительных частях растений, на различных поверхностях. Выявление ПАВ в смывах, сделанных на рабочем месте человека (с рабочего стола, клавиатуры и других предметов, с которыми часто соприкасается человек), позволяет установить наркопотребителя без согласия на тестирование и даже без ведома подозреваемого.
Определение наркотических и ПАВ в моче с помо-
Морозова Виталия Сергеевна, vmorozova@gmail.com
щью иммунохроматографических тестов — это наиболее простой метод выявления факта недавнего употребления ПАВ. Ранее нами разработан метод ИХА для определения ПАВ в слюне [9], предназначенный для установления состояния наркотического опьянения. Определение ПАВ в более сложных объектах, требующих пробоподготовки (волосы, ногти, смывы, небиологические объекты), производится только хромато-масс-спектрометрическими методами в химико-токсикологических и экспертно-криминалистических лабораториях [1, 13]. Задача настоящего исследования заключалась в разработке тест-систем ИХА и методик пробоподготовки для быстрого скрининга шести наиболее распространенных классов ПАВ (опиаты, амфетамины, каннабиноиды, экстази, бензодиазепины, метадон) в различных видах биологических и небиологических объектов: потожировых выделениях, волосах, смывах с поверхностей, частях растений, неизвестных субстанциях.
Материалы и методы. Использовали реагенты: белки овальбумин (Ова), бычий сывороточный альбумин (БСА) (Sigma, США), неорганические соли, органические растворители («Химмед», Россия), этиловый спирт медицинский 95% («Ферейн», Россия), наночастицы коллоидного золота (НКЗ) диаметром от 5 до 60 нм («ЭКОС-Сибирь», Россия), конъюгат овечьих антител к иммуноглобулинам мыши, меченные пероксидазой хрена («Имтек», Россия), антивидовые антитела кролик против мыши (antibodies-online GmbH, Германия), мышиные моноклональные антитела к морфину, амфетамину, А9-тетрагидроканнабинолу, экстази, диазепаму, метадону (antibodies-online GmbH, Германия).
Материалы: микропланшеты для ИФА («Nunc», Дания), нитроцеллюлозная мембрана (Whatman, США). Для приготовления спайковых образцов частей растений использовали табак трубочный (Погарская сигаретно-сигарная фабрика, Россия).
Биологические объекты: образцы мочи, смывов с кожи, волос были собраны у 65 пациентов Московского научно-практического центра наркологии Департамента здравоохранения г. Москвы. В качестве контроля использовали биологические образцы 10 здоровых доноров.
Синтез конъюгированных антигенов для изготовления тест-полосок проводили по методикам, описанным в литературе [7, 12].
Разработка ИХА. Выбор оптимальных концентраций конъюгатов Аг-Ова и Ат-Аи в ИХА проводили, как описано в [6].
Определение аналитических характеристик разработанных тест-систем. Предел обнаружения (ПО) определяли как концентрацию аналита, при которой процент положительных результатов теста равен или более 95%. Определение специфичности тест-полосок проводили путем анализа растворов веществ, являющихся близкородственными исследуемому веществу, в ФБС.(?)
Разработка методик пробоподготовки образцов. В качестве экстраагента использовали этиловый спирт медицинский, в качестве растворяющего буфера — ФБС. Смывы проводили с помощью деревянной палочки с тампоном. Экстракт высушивали в чашке Петри в вытяжном шкафу до полного высыхания.
Приготовление экстрактов волос. Волосы отбирали согласно методике, описанной в [10], мелко измельчали ножницами и экстрагировали этиловым спиртом 12 ч при периодическом встряхивании. Экстракт высушива-
Рис. 1. Устройство разработанных тест-полосок.
ли и растворяли в ФБС. Подобным образом проводили экстракцию измельченных частей растений.
Приготовление смывов с кожи и поверхностей. Смывы с кожи проводили с помощью деревянной палочки с тампоном, смоченным спиртом. Тампоном тщательно протирали поверхности рук и лица (главным образом вокруг рта), периодически смачивая его в спирте. Далее полоскали тампон в спирте, полученный смыв выливали в чашку Петри, высушивали на воздухе и растворяли в ФБС. Подобным образом проводили подготовку смыва с поверхности стола.
Образцы мочи, экстракты волос, частей растений, смывы с кожи и поверхностей также анализировали с помощью подтверждающего метода высокоэффективной жидкостной хроматографии — ВЭЖХ («Милихром А-02», Россия). Статистические характеристики разработанных тест-систем рассчитывали способом для методик с качественными результатами [11]: определяли число истинно положительных результатов теста (ИП), число ложноположительных (ЛП), истинно отрицательных (ИО) и ложноотрицательных (ЛО) результатов
Специфичность иммунохроматографических тест-полосок
Соединение ПО, нг/мл Соединение ПО, нг/мл
Полоска «Морфин» Полоска «Бензодиазепины»
Морфин 200 Альпразолам 195
Кодеин 300 Бромазепам 390
Героин 300 Клобазам 390
Этилморфин 6250 Диазепам 200
Гидрокодон 50000 Эстазолам 780
6-Моноацетилморфин 400 Флунитразепам >10000
Морфин З-Р-О-глюкоронид 1000 Лоразепам >10000
Оксикодон >10000 Нитразепам 100
Полоска «Амфетамин» Норхлордиазепоксид 3125
Э-амфетамин 300 Оксазепам 200
О,Ь-амфетамин 390 Триазолам >10000
Ь-амфетамин >10000 Полоска «Экстази»
3,4-Метилендиокси-амфетамин 1560 3,4-Метилендиоксиметамфетамин (МДМА) 500
Полоска «Каннабиноиды» 3,4-Метилендиоксиамфетамин 3000
11-Нор-Д9-ТГК-9 СООН 50 3,4-Метилендиоксиэтиламфетамин 300
Каннабинол >20000 D-Амфетамин 5000
11-Нор-Д8-ТГК-9 СООН 30 Полоска «Метадон»
Д8-ТГК 150 Метадон 300
Д9-ТГК 150 Доксиламин >10000
6-Моноацетилморфин (6-МАМ) 800
Морфин 3-Р^-глюкоронид 2650
Рис. 2. Схема проведения пробоподготовки и ИХА ПАВ в различных объектах.
теста. Статистическую чувствительность (Ч) теста рассчитывали по формуле: Ч= ИП ,
а статистическую специфичность (С) — по формуле: С = ИО
Результаты и обсуждение. При разработке имму-нохроматографических тест-систем для выявления низкомолекулярных веществ чаще всего используют непрямую конкурентную схему ИХА (рис. 1). На первой стадии разработки тест-полосок проводили предварительный подбор концентраций иммунореагентов в формате ИФА, используя параметры созданных нами ранее тест-систем ИФА [3, 13]. Затем на нитроцеллюлозной мембране оптимизировали эти концентрации. Для разработанных иммунохроматографических тест-систем
проведено исследование основных аналитических характеристик — чувствительности и специфичности определения наркотических и психотропных соединений. Пределы обнаружения ПАВ, т. е. минимально определяемая концентрация, установленная путем тестирования растворов ПАВ в ФБС, составили 200 нг/мл для морфина, 300 нг/мл для амфетамина, 50 нг/мл для каннабинои-дов, 300 нг/мл для метадона, 500 нг/мл для экстази и 200 нг/мл для диазепама.
Специфичность разработанных тест-полосок определяли путем внесения растворов близкородственных соединений в разных концентрациях в ФБС. В табл. 1 приведены минимальные концентрации веществ, при которых тест-полоска показывает положительный результат.
Процедуры пробоподготовки биологических и небиологических объектов разрабатывали с учетом использования набора реагентов в «полевых» условиях без специального лабораторного оборудования. В работе
Статистические характеристики ИХА ПАВ в моче, экстрактах волос, смывах с кожи
Показатель Опиаты Амфетамины Каннабиноиды
Число лиц, употребляющих ПАВ 20 18 12
Объект исследования Моча Волосы Кожа Моча Волосы Кожа Моча Волосы Кожа
Чувствительность, % 100 90 90 100 89 89 100 86 91
Специфичность, % 100 100 100 100 100 100 100 100 100
Класс ПАВ Экстази Метадон Бензодиазепины
Число лиц, употребляющих ПАВ 9 9 8
Чувствительность, % 100 89 95 100 89 89 100 100 94
Специфичность, % 100 100 100 100 100 100 100 100 100
проводили подбор соотношения массы (объема) образцов и объемов растворителя (ФБС) для максимального извлечения ПАВ из образца и успешного определения с помощью тест-полосок. Разработанные методики про-боподготовки представлены на рис. 2.
На первом этапе измельчают объект, если это требуется (волосы, части растений, твердые объекты). Твердый объект «натирают» абразивной бумагой до состояния порошка. Далее помещают (200 мг) во флакон с этанолом (5 мл), встряхивают и оставляют на ночь до полной экстракции.
При исследовании следов наркотических веществ на поверхностях приготавливают смыв, используя палочку с ватным тампоном, смоченным этанолом (5 мл), которым несколько раз протирают поверхность (объект), помещают тампон во флакон с растворителем, перемешивают, повторяют процедуру несколько раз. Затем раствор в чашке Петри высушивают в потоке воздуха или оставляют в вытяжном шкафу до полного высыхания (2-3 ч). Далее к остатку добавляют 0,5 мл ФБС, встряхивают и проводят ИХА. Неизвестные жидкости (5-10 капель) смешивают непосредственно с 0,5 мл ФБС и анализируют.
Характеристики разработанных методик определяли при анализе реальных образцов наркозависимых (моча, волосы, смывы с кожи). Вычисляли статистическую чувствительность и специфичность методик (табл. 2). Указанные характеристики составили значения от 89 до 100%, что доказывает высокую для предварительного метода достоверность определения ПАВ в данных биообъектах.
Апробацию методик для выявления ПАВ в частях растений и смывах с поверхностей проводили с помощью теста введено-найдено. Сравнение введенной и найденной концентрации показывает, что процент извлечения ПАВ из растений составляет 51-70, а в смывах с поверхностей он равен 44-60. Данные значения приемлемы для целей предварительного скрининга ПАВ в «полевых» условиях. Созданные методики пробопод-готовки направлены не на количественное извлечение, а на быстрый скрининг без применения специального оборудования.
Разработанные тест-полоски и методики пробоподго-товки легли в основу создания тест-системы, состоящей из набора тест-полосок, запаянных в пластиковый корпус, флакона с растворителем (5 мл), флакона с ФБС (0,5 мл), деревянной палочки с ватным тампоном, чашки Петри, бумаги абразивной.
Заключение. Разработанные наборы реагентов могут использоваться в «полевых» условиях для предварительного анализа на наличие наркотического или психо-
активного вещества в объекте и установление его класса без применения дополнительного оборудования и реактивов. Разработанные тест-системы имеют широкие перспективы применения. Их могут использовать криминалисты, оперативные службы при выявлении наркопотребления в школах, колледжах, училищах, вузах, в наркологических лечебных учреждениях. Кроме того, их можно использовать в автохозяйствах при предрей-совых осмотрах водителей транспортных средств, при массовых обследованиях контингента лиц повышенного риска (заключенные в местах отбывания наказания, подростки, стоящие на учете в милиции и др.), для самоконтроля.
1. Брюн Е.А., Мягкова М.А., Морозова В.С., Морозов С.В. Сравнительный опыт определения наркотических веществ в России и за рубежом. Вопросы наркологии. 2011; 1: 7-14.
2. Горбачева Н.С., Морозова В.С., Мягкова М.А. Сравнительное иммунохроматографическое определение наркотических веществ в жидкости ротовой полости, моче и волосах человека. Вопросы наркологии. 2013; 5: 94-9.
3. Демерчян Ш.А., Петроченко С.Н., Смирнов А.В., Абраменко Т.В., Мягкова М.А. Твердофазный иммуноферментный метод определения амфетаминов в моче. Клиническая лабораторная диагностика. 2007; 12: 20-33.
4. Киселева Р.Ю., Мягкова М.А., Анохин Л.А., Петроченко С.Н., Смирнов А.В., Морозова В.С., Брюн Е.А. Сравнительный анализ выявления амфетаминов методом ИФА и газовой хроматографии с масс-спектрометрической детекцией. Судебно-медицинская экспертиза. 2010; 2: 42-4.
5. Киселева Р.Ю., Мягкова М.А., Шакир И.В., Брюн Е.А., Морозова В.С. Разработка иммуноферментного анализа амфетаминов в биологических жидкостях человека. Биотехнология. 2010; 4: 89-93.
6. Любавина И.А., Зинченко А.А., Лапенков М.И., Николаева Т.Л. Экспресс-метод выявления морфина в водных образцах с помощью иммунохроматографии с использованием моноклональных антител, меченных коллоидным золотом. Биоорганическая химия. 2005; 31(1): 108-12.
7. Мягкова М.А., Лушникова М.В., Полевая О.Ю. Иммунохимиче-ские свойства естественных и индуцированных антител человека к морфину. Вопросы наркологии. 1989; 4: 7-11.
8. Мягкова М.А., Морозова В.С. Способ определения наркотических средств в ротовой жидкости человека методом иммунох-роматографии. Патент на изобретение RU 2442988. 2010.
9. Солодухина Н.М., Абраменко Т.В., Пушкина В.В., Морозова В.С., Мягкова М.А., Грицкова И.А. Экспресс-метод для определения опиатов в биологических жидкостях человека. Микроэлементы в медицине. 2010; 11(3-4): 71-4.
10. Приказ Минздравсоцразвития РФ от 27 января 2006 г. № 40 «Об организации проведения химико-токсикологических иссле-
дований при аналитической диагностике наличия в организме человека алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ». Available at: http://docs.pravo.ru/ document/view/13349/17359/
11. He J., Parker S. Chapter 2.7 Qualitative Immunoassay — Features and Design. In: The Immunoassay Handbook. Theory and Applications of Ligand Binding, ELISA and Related Techniques. Wild D., ed. Elsevier Science. 2013. 139-47.
12. Hermanson G.T. Bioconjugate Techniques. Third Edition. USA: Academic press, 2013.
13. Imbert L., Dulaurent S., Mercerolle M., Morichon J., Lachatre G., Gaulier J.-M. Development and validation of a single LC-MS/MS assay following SPE for simultaneous hair analysis of amphetamines, opiates, cocaine and metabolites. Forensic Science International. 2014; 234: 132-8.
14. Otero-Fernández M., Cocho J.Á., Tabernero M.J., Bermejo A.M., Bermejo-Barrera P., Moreda-Piñeiro A. Direct tandem mass spec-trometry for the simultaneous assay of opioids, cocaine and metabolites in dried urine spots. Anal. Chim. Acta. 2013; 784(19): 25-32.
i Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
1. Bryun E.A., Myagkova M.A., Morozova V.S., Morozov S.V. Comparative experience of drugs of abuse detection in Russia and other countries. VoprosyNarkologii. 2011; 1: 7-14. (in Russian)
2. Gorbacheva N.S., Morozova V.S., Myagkova M.A. The comparative detection of the narcotic drugs by immunochromatographic assay in human oral fluid, urine and hair. Voprosy Narkologii. 2013; 5: 94-9. (in Russian)
3. Demerchyan S.A., Petrochenko S.N., Smirnov A.V., Abramenko T.v., Myagkova M.A. Enzyme kinked immunosorbent assay of amphetamines in urine. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2007; 12: 20-33. (in Russian)
4. Kiseleva R.Yu., Myagkova M.A., Anokhin L.A., Petrochenko S.N., Smirnov A.V., Morozova V.S. et al. Comparative analysis of amphetamines determination by ELISA and gas chromatography with mass spectrometric detection. Sudebno-meditsinskaya Ekspertiza. 2010; 2: 42-4. (in Russian)
5. Kiseleva R.Yu., Myagkova M.A., Shakir I.V., Bryun E.A., Morozova
V.S. Development of Enzyme Immunoassay of Amphetamines in Human Biological Fluids. Biotekhnologiya. 2010; 4: 89-93.
6. Lyubavina I.A., Zinchenko A.A., Lapenkov M.I., Nikolaeva T.L. Method of express morphine detection in water samples by means of immunochromatography with the use of monoclonal antibodies labeled by colloidal gold. Bioorganicheskaya Himiya. 2005; 31(1): 108-12. (in Russian)
7. Myagkova M.A., Lushnikova M.V., Polevaya O.Yu. Immunochemical properties of natural and induced human antibodies to morphine. Voprosy Narkologii. 1989; 4: 7-11. (in Russian)
8. Myagkova M.A., Morozova V.S. Method of narcotic substances determination in human oral fluid using the immunochromatography. Patent RFN 2442988, 2010. (in Russian)
9. Solodukhina N.M., Abramenko T.V., Pushkina V.V., Morozova V.S., Myagkova M.A., Gritskova I.A. Express method for opiates detection in human biological fluids. Mikroelementy v Meditsine. 2010; 11(3-4): 71-4. (in Russian)
10. Order of the Health Ministry from 27.01.2006 N 40 «On the organization of the chemical-toxicological studies with analytical diagnosis of the presence in the body of alcohol, narcotics, psychotropic and other toxic substances». Available at: http://docs. pravo.ru/document/view/13349/17359/ (in Russian)
11. He J., Parker S. Chapter 2.7 Qualitative Immunoassay — Features and Design. In: The Immunoassay Handbook. Theory and Applications of Ligand Binding, ELISA and Related Techniques. Wild D., ed. Elsevier Science. 2013. 139-47.
12. Hermanson G.T. Bioconjugate Techniques. Third Edition. USA: Academic Press, 2013.
13. Imbert L., Dulaurent S., Mercerolle M., Morichon J., Lachatre G., Gaulier J.-M. Development and validation of a single LC-MS/MS assay following SPE for simultaneous hair analysis of amphetamines, opiates, cocaine and metabolites. Forensic Science International. 2014; 234: 132-8.
14. Otero-Fernández M., Cocho J.Á., Tabernero M.J., Bermejo A.M., Bermejo-Barrera P., Moreda-Piñeiro A. Direct tandem mass spec-trometry for the simultaneous assay of opioids, cocaine and metabolites in dried urine spots. Anal. Chim. Acta. 2013; 784(19): 25-32.
Поступила 02.02.15 Received 02.02.15
| Начинается подписка на журнал |
| «Клиническая лабораторная диагностика» |
| на II полугодие 2015 г. =
| Индекс журнала — 71442 =
= в Каталоге Агентства «Роспечать». =
Определение пав и их метаболитов в биологических жидкостях что это
Главная | Обучающие материалы | Для студентов | Частная психиатрия | Глава №26. Расстройства, связанные с приемом психоактивных веществ и аддиктивные состояния
Частная психиатрия
- Глава №26. Расстройства, связанные с приемом психоактивных веществ и аддиктивные состояния
- Глава №26. Расстройства, связанные с приемом психоактивных веществ и аддиктивные состояния
- Определение, цели и задачи наркологии
- Классификация аддикций в МКБ-10
- Определение и виды аддикций
- Определение и виды психоактивных веществ
- Клинико-фармакологическая классификация ПАВ
- Сравнение отдельных форм химических аддикций
- Этиопатогенез аддикций: биологические теории
- Этиопатогенез аддикций: психологические и социологические теории
- Эпидемиология наркологических расстройств
- Общая психопатология наркологических заболеваний: синдром острой интоксикации и большой наркоманический синдром
- Общая психопатология наркологических заболеваний: абстинентный синдром и анозогнозия
- Общая психопатология наркологических заболеваний: последствия и осложнения
- Течение аддикций
- Стадии развития аддикций
- Ремиссии при аддикциях
- Зависимость от азартных игр (патологический гэмблинг)
- Другие виды нехимических аддикций
- Новые виды аддикций
- Лечение наркологических заболеваний
- Профилактика аддикций
Определение и виды психоактивных веществ
Под психотропным веществом принято понимать вещество, влияющее на ЦНС, под психоактивным – психотропное вещество, обладающее аддиктивными свойствами и способное вызывать зависимость.
Психоактивные вещества (ПАВ) способны при однократном приеме, вызывать положительные эмоциональные переживания, а при систематическом употреблении — физическую и психическую зависимость.
Психотропные вещества – ПАВ, оборот которых регулируется международными конвенциями.
Различают следующие виды ПАВ:
1. Алкоголь (приравнен по статусу к пищевым продуктам)
2. Наркотики – должны соответствовать трем критериям:
а) Обладают свойствами ПАВ (медицинский критерий);
б) Немедицинское потребление имеет большую социальную значимость (социальный критерий);
в) Включено в список наркотических средств и запрещено к распространению и употреблению (юридический критерий).
3. Ненаркотические ПАВ (ПАВ, но не входят в список наркотиков)
В зависимости от вида ПАВ получило свое название и заболевание:
- Алкогольная зависимость (алкоголизм, хронический алкоголизм, по МКБ-10 – синдром зависимости от алкоголя) — болезнь, вызванная зависимостью от приема спиртосодержащих продуктов (вина, пива, крепких спиртных напитков и др.)
- Наркомания (по МКБ-10 – синдром зависимости от наркотических веществ) — болезнь, вызванная систематическим употреблением ПАВ, включенных в государственный список наркотических веществ, проявляющаяся психической и физической зависимостью от них (например, героиновая зависимость, кокаиновая зависимость и т.п.)
- Токсикомания — болезнь, вызванная систематическим употреблением психоактивных веществ, НЕвключенных в государственный список наркотических веществ, проявляющаяся психической и физической зависимостью от них (например, зависимость от летучих растворителей и др.)
- Полинаркомания — одновременная зависимость от двух и более наркотиков.
- Политоксикомании – одновременная зависимость от двух и более ненаркотических веществ.
- Одновременная зависимость от одного наркотического и другого ненаркотического вещества — осложненная наркомания.
С клинической стороны подход к больным наркоманиями и токсикоманиями и принципы их терапии идентичны. Различия определяются только юридическим критерием, который отсутствует при токсикоманиях. Список наркотических веществ постоянно пополняется новыми наименованиями и болезни переходят из токсикоманий в наркомании.
Тесты на наркотики
Несмотря на активную борьбу государства и социальных организаций с распространением и употреблением наркотиков, наркомания продолжает распространяться с большой скоростью.
По данным Минздрава Российской Федерации, в 2022 году в нашей стране было зарегистрировано 388 000 людей, страдающих от наркотической зависимости.
И это только официальные цифры. На самом же деле количество употребляющих психоактивные вещества в разы больше.
В настоящее время одним из самых точных и эффективных методов диагностики наркотической зависимости являются тесты на наркотики. С их помощью можно узнать, употребляет ли человек запрещенные вещества, в каких количествах и как часто.
Что такое тест на наркотики
Тест на наркотики, иногда также называемый скринингом на наркотики, представляет собой диагностическое исследование, проводимое с целью выявления в биологических образцах человеческого тела психоактивных веществ или их метаболитов. Метаболит – это неактивная метаболизированная форма исходного лекарственного средства (продукт распада).
С помощью некоторых тестов можно определить только фактическое наличие наркотика в организме (например, при использовании анализа крови). С помощью других определяются метаболиты психоактивных веществ, которые могут оставаться в организме на протяжении длительного времени (нескольких недель и даже больше).
Тестирование на употребление наркотиков и психотропных веществ проводят как в государственных, так и в частных клиниках. Однако в случае сдачи анализа в частном медицинском центре факт исследования и его результат носят анонимный характер. В то время как положительный результат теста на прием наркотиков в государственном медицинском учреждении обязует врачей передать данные пациента в наркологический диспансер (для постановки на учет).
Как работает тест на наркотики
Выявить употребление психоактивных веществ помогают аптечные и лабораторные тесты. Первые используются самостоятельно дома, вторые — только в медицинском учреждении.
Аптечные тесты на наркотики представляют собой специальные полоски, пропитанные реагентами, чувствительными к наркотическим веществам, указанным на упаковке. Все, что нужно сделать, это купить один из домашних тестовых наборов, собрать образец мочи или слюны, окунуть полоску в биологическую жидкость на указанное время и оценить результат. Тест-полоски на наркотики для самостоятельного использования доступны как в аптеках, так и в интернет-магазинах. Они просты в использовании и снабжены подробными инструкциями.
Принцип действия тестов на наркотики из аптеки заключается во взаимодействии биологической жидкости (мочи или слюны) с индикаторами, позволяющими выявить наличие психоактивных веществ в образце в течение 10-15 минут. В основе данного исследования лежит метод иммунохроматографии.
Домашние экспресс-тесты могут определить от 3 до 10 видов психоактивных препаратов в организме человека (в зависимости от конкретного типа теста).
Однако некоторые наркотики обнаружить с помощью этого метода достаточно сложно. Так, например, в состав спайса и синтетических солей одновременно входит несколько видов психоактивных веществ в микродозах, которые тест может не определить и выдать ложноотрицательный результат. Разработки химиков появляются с такой скоростью, что фармацевтические компании просто не успевают выпускать новые индикаторы.
Важно! Самостоятельное домашнее тестирование на наркотики не имеет юридической силы и иногда может показывать ложноположительный или ложноотрицательный результат.
Лабораторный скрининг на наркотики – более точный метод исследования, в ходе которого может использоваться не только слюна и моча, но и образцы крови, волос и даже ногтей человека.
Сбор образца, необходимого для проведения теста, осуществляется медицинским персоналом, после чего биоматериал доставляется в лабораторию для исследования. В среднем, проведение лабораторного скрининга на наркотики составляет около 2-3 дней (в зависимости от тестируемого образца).
Профессиональное тестирование на наркотики позволяет выявить широкий спектр психоактивных веществ в организме: кокаин, марихуану, экстази, метадон, барбитураты, спайсы, кетамин, амфетамин, метамфетамин, трамадол и другие.
В основе таких тестов лежат методы газовой хроматографии/масспектрометрии (ГХ-МС), а также иммунохроматографии.
Главное преимущество лабораторного тестирования на наркотики – это 100% точность результата, который нельзя изменить или подделать.
Виды наркотических тестов
Современные медицинские тесты на наркотики позволяют определить практически все известные психоактивные вещества.
В зависимости от типа используемого биологического материала они делятся на:
- Тест на наркотики в моче. Является самым популярным методом тестирования, который чаще всего используется работодателями, судом и правоохранительными органами. Анализ мочи на наркотики не выявляет фактическое наличие психоактивного вещества в организме. Он определяет метаболиты наркотиков — побочные продукты их распада, которые надолго остаются в организме. Например, основным метаболитом марихуаны является THC-COOH, который растворяется в жирах и может обнаруживаться в моче в течение 2-х недель.
Преимущества данного метода тестирования включают в себя: надежность и точность результатов, низкую стоимость тестов и доступность, простоту применения, быстрый результат. Однако он также имеет и минусы: обнаруживает только метаболиты ПАВ, создает биологическую опасность (обращение персонала с образцами, транспортировка и т. д.), имеет ограниченное окно обнаружения (обычно меньше недели), а также может быть фальсифицирован (путем замены или разбавления образца биологической жидкости). - Тест на наркотики по крови. Анализ крови является наиболее точной формой тестирования на наркотики. В отличие от анализа мочи, он определяет фактическое наличие наркотиков в организме, а не их метаболиты.
К преимуществам данного метода относится то, что забор образца осуществляется медицинским специалистом, что исключает возможность обмана или фальсификации со стороны испытуемого. Поэтому анализ крови на наркотики считается самым надежным типом тестирования и его результат имеет юридическую силу в суде.
Но все же, он не лишен недостатков. Во-первых, процедура является инвазивной, то есть требует медицинского вмешательства – забора крови из вены. Но самая большая проблема с тестированием на наркотики по образцам крови — крайне ограниченное окно обнаружения. Дело в том, что большинство психоактивных веществ не остаются в кровотоке надолго. Например, марихуана обычно не определяется анализом крови уже через несколько часов после употребления. - Тест на наркотики по слюне. Простота использования и низкая стоимость являются ключевыми факторами, которые делают тест слюны популярным методом тестирования на наркотики. Выявление остаточных количеств ПАВ с помощью анализа ротовой жидкости особенно эффективно, потому что образцы могут выявить употребление наркотиков в период от нескольких минут до 48 часов. Однако его точность может быть сомнительной, если забор сделан неправильно.
- Тест на наркотики по волосам. Этот тест обнаруживает метаболиты ПАВ, поступающие из кровотока в волосяной фолликул. Его главный плюс — определение долгосрочного присутствия наркотиков в организме. Например, даже если человек употреблял наркотик месяц назад, анализ волосяных фолликулов покажет положительный результат.
Тестирование волос считается одним из самых надежных типов тестов на наркотики из-за его защищенности от мошенничества. Он также имеет самое длинное окно обнаружения — позволяет выявить вещества в течение 90 дней после употребления. С помощью анализа волос на наркотики можно точно определить, какие препараты принимались, как долго и когда их использование было прекращено. Самым большим недостатком данного исследования является то, что он не отражает текущее употребление ПАВ и является дорогостоящим.
Какие наркотики показывает тест
Тесты на наркотики позволяют обнаружить следующие вещества:
- кокаин;
- героин;
- морфин;
- оксикодон;
- гидроморфон;
- метаквалон;
- кодеин;
- марихуана;
- барбитураты (такие как фенобарбитал, циклобарбитали т. д.);
- фенциклидин;
- амфетамин;
- метамфетамин;
- декстропропоксифен;
- бензодиазепины (диазепам, нордазепам и др.);
- дизайнерские наркотики (например, экстази, кетамин или рогипнол);
- галлюциногены (ЛСД, мескалин, «волшебные грибы» и др.);
- анаболические стероиды.
Какие лекарства дают положительный тест на наркотики
Положительный тест на наркотики могут вызвать препараты, содержащие в своем составе фенобарбитал (Корвалол, Андипал, Валосемид, Валокордин, Валосердин), кодеин (Пентанов, Седальгин-Нео, Терпинкод, Пиралгин), а также бензодиазепины (Нозепам, Фенозепам, Бензозепам и другие).
После принятия этих лекарственных средств в биологических жидкостях человека сохраняются их метаболиты. Поэтому они могут быть определены во время тестирования на наркотики. В этом случае человеку придется доказывать, что он употреблял препараты с целью лечения.
Что влияет на тест на наркотики
На результаты теста на наркотики могут влиять различные факторы:
- Время, которое проходит между сбором проб и тестированием. Чем больше проходит времени, тем менее точным будет результат.
- Уровень гидратации организма. Чрезмерное потребление воды может привести к снижению уровня метаболитов наркотиков в моче.
- Фальсификация. Если сданный образец подделан (например, заменены образцы мочи), результат будет ложным.
- Окно обнаружения. Например, окно обнаружения психоактивных веществ в образцах ротовой жидкости составляет от 0 до 2-х дней. Если тест выполнен позже, его результат будет недостоверным.
Тест на наркотики считается положительным, если количество психоактивного вещества, обнаруженного в ходе предварительного исследования биологических образцов, превышает заранее установленные пороговые уровни.
Во избежание ошибок медицинские работники проводят дополнительное подтверждающее исследование в лаборатории с помощью газовой хроматографии и масс-спектрометрии. Эти тесты имеют более низкий порог обнаружения.
Пороги обнаружения для разных наркотиков отличаются:
- Метаболиты марихуаны: начальный — 25 нг/мл, подтверждающий — 15 нг/мл.
- Метаболиты опиатов (кодеин и морфин): начальный — 500 нг/мл, подтверждающий – 5-20 нг/мл.
- Ацетилморфин (героин): начальный и подтверждающий – 10 нг/мл.
- Фенциклидин (PCP): начальный и подтверждающий — 25 нг/мл.
- Амфетамины/метамфетамины: начальный – 50 нг/мл, подтверждающий – 20 нг/мл.
- МДМА (экстази): начальный — 50 нг/мл, подтверждающий — 40 нг/мл.
- Метаболиты кокаина: начальный — 50 нг/мл, подтверждающий — 30 нг/мл.
- Барбитураты: начальный — 500 нг/мл, подтверждающий – 10-100 нг/мл.
Где требуется обязательный тест на наркотики
Проведение обязательного тестирования на наркотики может потребоваться в следующих случаях:
- При подозрении на вождение автомобиля в состоянии наркотического опьянения.
- При участии водителя в дорожно-транспортном происшествии.
- При совершении правонарушений и преступлений (например, кражи, разбойного нападения и т.д.).
Распространенным явлением также является проведение теста на наркотики при приеме на работу и среди студентов учебных учреждений.
В интересах любой крупной компании следить за тем, чтобы ее сотрудники не употребляли наркотики. Особенно это касается транспортных, охранных, авиационных предприятий. К преимуществам тестирования относятся: снижение прогулов, краж, количества несчастных случаев на рабочем месте, а также затрат на здравоохранение.
Кроме того, иногда проводится тест на наркотики в военкоматах. Как правило, это делается в случаях, если при прохождении медицинской комиссии у человека отмечаются явные признаки употребления психоактивных веществ.
ВАЖНО! Обязательное тестирование на наркотики проводится только медицинским персоналом в государственных лечебных учреждениях, либо частных клиниках, имеющих соответствующую лицензию.
Расшифровка теста на наркотики
Результат аптечного теста на наркотики считается положительным, если на кассете или тест-полоске появилась одна яркая красная полоска. Если полосок две, он отрицательный.
В лабораторных условиях эту работу выполняет специальный прибор. Он считает, какое количество психоактивного вещества было обнаружено в 1 мл биологической жидкости, а затем выдает результат на листе бумаги.
Что делать, если тест на наркотики положительный
Если вы сдавали анализ лично, и он оказался положительным несмотря на то, что вы не употребляли запрещенных веществ, необходимо пересдать материал. Обычно ложноположительный результат появляется на экспресс-полосках и кассетах из-за неправильного эксплуатирования или же при употреблении определенных медикаментозных препаратов (например, Корвалола, содержащего в своем составе фенобарбитал).
Наркотики и психотропные вещества — скрининг (анализ мочи на опиаты, амфетамин, метамфетамин, кокаин, каннабиноиды и их метаболиты)
Тесты на присутствие в организме наркотических и психотропных препаратов предназначены для использования в медицинских целях: для выявления факта употребления, для мониторинга терапии препаратами, содержащими наркотические, психотропные вещества.
Результаты тестирования не могут являться предметом судебной экспертизы. Используемые методы скринингового исследования являются предварительными и, в некоторых случаях, требуют проведения подтверждающего исследования с использованием референсных методов.
Моча считается предпочтительным материалом для проведения скринингового определения психоактивных веществ, поскольку методы такого исследования хорошо отработаны, материал может быть легко получен в достаточном количестве и обычно содержит экскретируемые вещества в концентрированной форме. В то же время следует иметь в виду, что концентрация исследуемого вещества или метаболитов в моче может не отражать его концентрацию в крови или степень повреждающего эффекта, это лишь признак, указывающий на факт употребления. Результат теста следует оценивать в комплексе с клиническими данными и результатами всех остальных диагностических процедур.
Приблизительный период возможного
выявления наркотических веществ в мочеВещество Период выявления Опиаты и их метаболиты 2 суток Метаболиты кокаина 2 суток Каннабиноиды (марихуана) до нескольких недель Амфетамин 2 — 3 суток Метамфетамин 2 суток Один из наиболее известных опийных препаратов, связанных со злоупотреблением наркотиками, – героин. В крови он быстро метаболизирует в 6-ацетилморфин, который далее подвергается превращению в морфин или глюкуронид морфина, который экскретируется с мочой. Примерно 10% от применяющейся дозы кодеина также преобразуется в морфин, который далее метаболизирует аналогичным способом. Поэтому в моче людей, употреблявших кодеин, могут содержаться небольшие количества морфина, глюкуронида морфина и N-норморфина. Период полувыведения морфина из крови составляет 2 — 4 часа. Приблизительный период выявления в моче – 48 часов.
Амфетамин (Amphetamine), метамфетамин (Methamphetamine) Амфетамин и метамфетамин – стимуляторы центральной нервной системы. В медицине их используют для лечения тучности, нарколепсии, гипотензии. Применяются обычно перорально или в виде внутривенной инъекции. Имеет место нелегальное распространение и злоупотребление этими веществами, связанное с их стимулирующим эффектом. Период полувыведения из крови 12 часов. Приблизительный период выявления в моче 2 — 3 суток.
Кокаин (Cocaine)
Кокаин – алкалоид естественного происхождения, сильнодействующий стимулятор центральной нервной системы, часто связанный со случаями злоупотребления наркотиками. Его могут вводить в организм вдуванием через нос, ингаляцией в легкие при курении или внутривенной инъекцией. Бензоилэкгонин (основной метаболит кокаина) составляет 35 — 54% от общего количества экскретирующихся производных кокаина в суточной моче. Мочевая экскреция кокаина и его метаболитов начинается через 20 минут после его введения через нос. Период полувыведения кокаина из крови составляет 0,5 — 1,5 часа. Приблизительный период выявления кокаина в моче – 6 — 8 часов, бензоилэкгонина – 2 суток.
Марихуана (каннабиноиды, cannabinoids, marijuana)
Марихуана – препарат листьев растения Cannabis sativa. Основной компонент марихуаны, связанный с ее воздействием на психику – это дельта-9-тетра-гидроканнабинол (delta-9-THC-9-carboxylic acid, THC), действующий на центральную нервную систему и сердечно-сосудистую систему. Тест-система предназначена для выявления этого компонента в моче. Период его полувыведения из крови составляет 14 — 38 часов. THC может персистировать в моче до нескольких недель после последнего приема (зависит от частоты и длительности употребления), поскольку он сохраняется в жировой ткани. Пассивная ингаляция дыма марихуаны может вызывать появление препарата в моче, но не выше обозначенного порога — 50 нг/мл.
Литература
- Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006, p.1798.
- Kim Wolff, Sarah Welch & John Strang Значение специальных лабораторных исследований для оценки и лечения расстройств, вызванных употреблением психоактивных веществ. Advances in Psychiatric Treatment 1999, vol. 5, pp. 180-191 (цит. по: Обзор современной психиатрии, 2000, вып. 6).
- Материалы производителя к наборам реагентов.
Подготовка
Моча должна быть собрана в чистый, неиспользованный прежде контейнер (примеси гипохлорита, моющих средств и других веществ могут искажать результат). Контейнер следует заполнить полностью для предотвращения испарения или окисления. Сохранность 48 часов при температуре +2 — +8 ºС, для более длительного хранения необходимо заморозить при температуре -10 ºС и ниже.
Литература
- Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006, p.1798.
- Kim Wolff, Sarah Welch & John Strang Значение специальных лабораторных исследований для оценки и лечения расстройств, вызванных употреблением психоактивных веществ. Advances in Psychiatric Treatment 1999, vol. 5, pp. 180-191 (цит. по: Обзор современной психиатрии, 2000, вып. 6).
- Материалы производителя к наборам реагентов.
Определение наличия в организме человека наркотических, психотропных и сильнодействующих веществ.
Литература
- Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006, p.1798.
- Kim Wolff, Sarah Welch & John Strang Значение специальных лабораторных исследований для оценки и лечения расстройств, вызванных употреблением психоактивных веществ. Advances in Psychiatric Treatment 1999, vol. 5, pp. 180-191 (цит. по: Обзор современной психиатрии, 2000, вып. 6).
- Материалы производителя к наборам реагентов.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения: тест качественный, результат выдаётся в форме «положительно» или «отрицательно».
Чувствительность теста:- опиаты/морфин/героин — 300,0 нг/мл;
- амфетамин — 1000,0 нг/мл;
- метамфетамин – 1000 нг/мл;
- кокаин — 300,0 нг/мл;
- марихуана — 50,0 нг/мл.